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實時熒光定量PCR課后考試練習
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一、單選題（每題4分，共15題，滿分60分）
1. PCR（聚合酶鏈式反應）的核心目的是（ ）
A. 分離DNA單鏈
B. 擴增大量目標基因至可檢測水平
C. 穩(wěn)定反應體系pH值
D. 合成熒光染料
2. 標準PCR反應體系中，能增強DNA聚合酶活性的成分是（ ）
A. dNTP
B. 引物
C. Mg2?
D. Tris-HCl
3. PCR反應中，使雙鏈DNA解鏈為單鏈的步驟是（ ）
A. 低溫退火
B. 適溫延伸
C. 高溫變性
D. 循環(huán)起始
4. 實時熒光定量PCR（qPCR）與常規(guī)PCR的最主要區(qū)別是（ ）
A. 反應體系不同
B. 可實時監(jiān)控擴增過程并定量
C. 僅使用TaqMan探針法
D. 不需要引物
5. SYBR GreenⅠ染料法的局限性主要是（ ）
A. 成本高
B. 非特異性結(jié)合雙鏈DNA
C. 無法生成熔解曲線
D. 不能用于熒光檢測
6. 熔解曲線呈現(xiàn)單峰，說明PCR擴增的（ ）
A. 效率極高
B. 特異性好
C. 模板濃度高
D. 引物濃度適宜
7. TaqMan探針法中，熒光信號產(chǎn)生的原因是（ ）
A. 染料嵌合雙鏈DNA
B. 探針完整時熒光基團被淬滅
C. 探針水解后熒光基團與淬滅基團分離
D. 引物與模板結(jié)合
8. qPCR儀的核心組成部分不包括（ ）
A. 熱循環(huán)系統(tǒng)
B. 熒光檢測系統(tǒng)
C. 電泳系統(tǒng)
D. 數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)
9. 擴增曲線的四個階段中，熒光信號指數(shù)增長的階段是（ ）
A. 基線期
B. 指數(shù)增長期
C. 線性增長期
D. 平臺期
10. Ct值是指（ ）
A. 基線期的循環(huán)數(shù)
B. 閾值線與擴增曲線交點對應的循環(huán)數(shù)
C. 平臺期的熒光強度值
D. 線性增長期的斜率
11. 理想PCR反應中，第n次循環(huán)后的產(chǎn)物量計算公式是（ ）
A. X=X?×(1+Ex)?
B. X=X?×2?
C. X=X?+2?
D. X=X?×Ex?
12. 相對定量中常用的2???Ct法，其核心是比較（ ）
A. 目的基因與內(nèi)參基因的Ct值
B. 標準曲線與樣本曲線的斜率
C. 基線期與平臺期的熒光強度
D. 不同循環(huán)數(shù)的擴增效率
13. 內(nèi)參基因（管家基因）的主要作用是（ ）
A. 增強熒光信號
B. 校正實驗誤差，保證結(jié)果準確性
C. 提高擴增效率
D. 特異性結(jié)合靶基因
14. 若PCR擴增曲線無Ct值出現(xiàn)，可能的原因不包括（ ）
A. 熒光信號采集未設(shè)置
B. 模板降解
C. 引物濃度過高
D. 電腦自動休眠
15. 曲線末尾起跳且陰參也出現(xiàn)該現(xiàn)象，最可能的原因是（ ）
A. 模板濃度過高
B. 實驗污染
C. 延伸溫度過高
D. Mg2?濃度不足
二、多選題（每題8分，共5題，滿分40分，多選、少選、錯選均不得分）
1. 標準PCR反應體系的五要素包括（ ）
A. 模板DNA
B. 引物
C. Taq DNA聚合酶
D. dNTP混合物
E. 鎂離子
2. 熒光定量PCR的化學原理包括以下哪些方法（ ）
A. SYBR GreenⅠ染料法
B. TaqMan探針法
C. 電泳法
D. 測序法
E. 熔解曲線法
3. 導致熔解曲線出現(xiàn)雙峰的原因有（ ）
A. 非特異性擴增
B. 引物二聚體
C. 實驗污染
D. 模板濃度過低
E. 延伸時間不足
4. 以下哪些屬于PCR擴增曲線的異常類型（ ）
A. 斜直型曲線
B. 山域型曲線
C. 末尾起跳曲線
D. 有尖峰的曲線
E. 平行性好的曲線
5. 影響PCR擴增效率的因素包括（ ）
A. Mg2?濃度
B. 引物濃度
C. 模板匹配度
D. 循環(huán)次數(shù)
E. 樣本中的抑制物
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